芥酸是菜子油中一种二十二碳单不饱和脂肪酸,含20%~50%,对人体有一定毒性。芥酸检测方法有气相色谱法。
1.仪器
GC仪(具氢火焰检测器)。
2.试剂
①石油醚。
②甲醇。
③无水Na2SO4。
④饱和NaCl液。
⑤二十三烷酸甲酯(1mg·mL-1):石油醚配制。
⑥芥酸甲酯(1mg·mL-1):石油醚配制。
3.仪器工作条件
①玻璃色谱柱:(1.85m×2mm),内填10%EGA的Chromosorbw(80~100目)。
②柱温215℃,进样口温度250℃,检测器温度250℃。
③载气[N2(99.99%),流速40mL/min]。
④进样量2µL。
4.检测步骤
取1g样品于磨口锥形瓶中,加二十三烷酸甲酯1mL,加石油醚10mL,加玻璃珠5粒,接上冷凝装置,在沸水浴中回流30min,回收石油醚,用N2吹干。加5mL石油醚溶解残渣,在沸水浴中回流2min,冷却,加饱和NaCl液至溶剂层上升至瓶颈处,用无水Na2SO4脱水,待检。取2µL溶液注入GC仪(同时分别取二十三烷酸甲酯标准液及芥酸甲酯标准液各2µL导人GC仪),记录各自峰面积(mm2)。
二十三烷酸甲酯内标定量。
菜子油中芥酸含量=[(A1×m2×f)/(A2×m1×1000)]×100%
式中:A1——样液中芥酸甲酯峰面积,mm2;
A2——样液中十二、十三烷酸甲酯峰面积,mm2;
m2——二十三烷酸甲酯含量,mg;
m1——样品质量,g;
f——标准液中芥酸甲酯和二十三烷酸甲酯峰面积与相应的标准脂肪酸重量之间的校正因子。