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棉酚检测——苯胺显色分光光度法

• 发布日期：2016/9/24 13:39:50 阅读次数：1228

• 1．原理

  样品中的游离棉酚经丙酮提取后，在乙醇中与苯胺生成黄色化合物，与标准比较定量。

  2．仪器

  分光光度计。

  3．试剂

  ①乙醇。

  ②苯胺。

  ③其他试剂同紫外分光光度法。

  4．检测步骤

  取1g样品于具塞锥形瓶中，加20mL70％丙酮，振荡30min，置冰箱中过夜，过滤于试管中，取2mL滤液于10mL比色管中，加3mL苯胺，混匀，于80℃水浴中加热15min，加乙醇至刻度，混匀，15min后，用lcm比色皿，空白管调零，于波长445nm处测吸光度(同时做空白试验)。

  5．标准曲线制备

  取标准应用液(50µg·mL-1)0．0mL、0．2mL、0．4mL、0．6mL、0．8mL、1．0mL分别于10mL比色管中，各管加70％丙酮至2mL，再各加苯胺3mL，混匀，于80℃水浴中加热15min，冷却，加乙醇至刻度，15min后，用1cm比色皿，零管调零，于波长445nm处比色，分别记录吸光度，绘制标准曲线。

  6．计算

  公式参照紫外分光光度法。

  7．说明

  苯胺为显色剂，应为无色或淡黄，若色深需重蒸馏。