1.原理
样品中棉酚经丙酮提取后,在紫外波长378nm处有最大吸收,其吸光度与棉酚含量成正比,经与标准比较定量。
2.仪器
紫外分光光度计。
3.试剂
①70%丙酮。
②棉酚标准贮存液(1mg·mL-1):称取棉酚标准品0.1000g于100mL容量瓶中,加70%丙酮溶解并定容至刻度。
③棉酚标准应用液(50µg·mL-1):用70%肉削稀粹足谷。
4.标准曲线制备
取棉酚标准应用液(50pg·mL-1)0.0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL分别于10mL比色管中,各加70%丙酮至刻度,混匀,10min后用lcm石英比色皿,波长378nm处,零管调零比色,分别记录吸光度,绘制标准曲线。
5.检测步骤
取1g样品于具塞锥形瓶中,加20mL70%丙酮,振荡30min,置冰箱中过夜,取上清液,过滤,取滤液于1cm石英比色皿,波长378nm,70%丙酮凋零,样品测吸光度。
根据样品的吸光度,即可从标准曲线查得样品中棉酚含量。
6.计算
X=(CS*1000)/[m*(V1/V2)*1000]
式中:x——棉子油中游离棉酚含量,mg·kg-1;
CS一—样液吸光度查标准曲线对应含量,µg;
V2——样液总体积,mL;
V1——样液检测体积,mL;
m——样品质量,g。
7.说明
①本法检测的是油样中的游离棉酚含量。
②本法用丙酮提取游离棉酚时,常有其他成分干扰而影响分析结果。