对油脂中的丙二醛进行检测,能准确地反映动物油脂酸败变质的程度。油脂中丙二醛检测主要采用硫代巴比妥酸分光光度法。
1.原理
油脂中不饱和脂肪酸经氧化分解产生丙二酸乙醛,经在酸性条件下随水蒸气蒸出,与硫代巴比妥酸试剂作用生成红色化合物,在波长535nm下比色,与标准比较定量。-
2.仪器
分光光度计。
3。试剂
①HCI(1+2)。
②液体石蜡。
③0.02mol·L-1硫代巴比妥酸(TBA)试剂:称取α—TBA0.2883g,溶于90%醋酸中,水浴中加热助溶,并用醋酸定容至100mL,贮于棕色瓶。
④丙二醛(TEP)标准贮存液(100µg· mL-1):称取1,1,3,3一四乙氧基丙烷0.
⑤TEP标准应用液(1.0µg·mL-1)。
4.标准曲线制备
取TEP标准应用液(1.0µg·mL-1)0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL于具塞试管中,用水补足至5mL,分别加TBA试剂5mL,混匀,置沸水浴35min,取出冷却,于1cm比色皿,波长535nm处测吸光度,绘制标准曲线。
5.检测
准确称取10g样品于凯氏烧瓶中,加20mL水、1mL(1+2)HCl,再调pH为1.5,加液体石蜡2mL,连接蒸馏装置进行蒸馏,收集蒸馏液50mL于锥形瓶中(同时做空白试验)。取蒸馏液5mL于具塞试管中,加TBA试剂5mL,混匀,置沸水浴35min,,取出冷却,于
6.计算
X=(CS*1000)/(m*V1*V2*1000)
式中:X——油脂中丙二醛含量,mg·kg-1;
Cs——样液吸光度查标准曲线得含量,µg;
m——样品质量,g;
V1——测试用体积,mL;
V2——蒸馏收集液体积,mL。
7.说明
肉脂或生脂肪需炼制成油待处理。如油脂凝固,需在水浴(