挥发性碱性总氮(TVBN),也称总挥发性盐基氨。是动物性食品在腐败过程中,由细菌酶食品分析的作用,使蛋白质分解而形成的物质,均具有挥发性。检测食品中TVBN的含量,有助于判定食品的新鲜度。TVBN检测方法一般用半微量定氮法。这里介绍半微量定氮法。
1. 原理
样品滤液与弱碱性MgO反应后,是肉中的碱性含氮物质游离,并被蒸馏出来,用2%H3BO3(含混合指示剂)吸收,再以标准酸滴定,求其含量。
2. 仪器
凯氏定氮蒸馏装置
3. 试剂
①1%MgO混悬液
②2%H3BO3
③0.0100 mol·L -1HCl
④混合指示剂液:0.2%甲基红乙醇液1份与0.2%溴甲酚绿乙醇液5份,临用时混合。
4. 检测
准确称取10g样品于烧杯中,加50m L蒸馏水混匀,浸泡30min,过滤,少许水洗,定量转入100m L容量瓶中,用水稀至刻度,摇匀。吸取5m L滤液于蒸馏反应瓶中,加5m L1%MgO液,盖塞,并用水封口,通人蒸汽蒸馏。在冷凝管下端放有吸收液10m L (含2滴混合指示剂)的锥形瓶,承接蒸馏液,蒸馏5min后停止,取下冷却,用0.0100 mol·L -1HCl标准液滴定至刚呈桃红色为终点,记录下消耗0.0100 mol·L -1HCl标准液的体积(mL),同时做空白试验。
5.计算
X=[(V-V2)*C*14*100]/[m*(5/100)]
式中:X——食品中TVBN含量,mg·(100g) -1;
V1——样液消耗HCl标准液体积,mL;
V2——空白液消耗卜ICl标准液体积,mL;
CS——HCl标准液浓度(0.0100mol·L -1);
m——样品质量,g;
14——1mol·L -1HCl标准液1mL相当于氮的毫克数。
6.说明
①肉浸液过滤可采用数层纱布除肉渣。
②蒸馏过程中,冷却水不能中断,通人蒸汽时所有管道应密闭,不能漏气。
③半微量蒸馏装置在使用前、后均需用蒸汽充分洗干净,并先做空白试验,空白值很低时,样液方可检测。
④每个样品检测之间应用蒸馏水洗2~3次。