(一)分析原理
样品中脂肪酸一般以甘油三酯形式存在,经氢氧化钾甲醇液甲酯化,生成相应的脂肪酸甲酯,经气相色谱分离并定量测定。
(二)仪器与试剂
(1)仪器Sigma 300气相色谱仪,LCI一100积分仪,SQF一200B型氢气发生器。
(2)试剂 AOCs混合油对照品RM3 SuPelcs 50mg、RM6 SuPelcs 50mg(MATREYA公司提供);棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸、亚麻酸均为气相色谱标准;乙醚、正己烷、甲醇、氢氧化钾均为分析纯。
(三)测定方法
(1)色谱条件色谱柱:2.1m×2mm不锈钢柱,填充15%CP—SIL 84白色高效担体100~120目。载气:N2 空气:30kPa。氢气:20kPa。检测器:FID。进样口温度:24O℃检测器温度:220℃程序升温:175℃ 180℃、210℃保持时间分别为7.Omin、8.Omin、5.Omin。升温速度:30℃/min。
(2)回归曲线制作精密吸取A()CS混合油对照品RM,SuPelcs、RM。SuPelcs,用乙醚一正己烷(2:1)溶解并稀释至适当浓度,定体积进样,制作标准曲线。
(3)样品制备取油样lOOmg(其他样品称样适当增加),置10m1.容量瓶中,加入乙醚一正己烷(2:1)1mL、甲醇1mL及0.8mol/L.氢氧化钾甲醇溶液lmL,摇匀,静置
5min,加水至刻度,取上层液进样。
(四)结果计算
以保留时间定性鉴定各种脂肪酸,以峰面积查标准曲线并计算出各种脂肪酸的含量,以上数据由积分仪或计算机处理。