河豚毒素检测方法有快速定性与生物毒素试验法、河豚毒素毒力检测法和紫外分光光度法。
一、快速定性与生物毒性试验法
1．试剂
①10％乙酸铅液。
②H2S。
③10％H3PO4·12WO3。
④无水乙醇。
⑤浓H2SO4。
⑥K2Cr2O7。
2．检测步骤
取100 g样品于组织捣碎器中，捣碎成匀浆，加100 mL水，混匀，10 min后过滤于锥形瓶中，加10 mL10％乙酸铅液，混匀，过滤于另一锥形瓶中，通人H2S，过滤于另一分液漏斗中，加10％H3PO4。12WO35 mL，混匀，过滤。滤液于另一锥形瓶中，置水浴蒸发至近干，移人真空干燥器干燥，残渣用无水乙醇浸制3次，不溶解带黄色残渣为河豚毒素。锥形瓶中的残渣分别用于定性和毒性试验。
①定性：取少许残渣于试管中，加浓H2SO4溶解，加K2Cr2O7少许，呈鲜艳绿色为阳性。
②毒性试验：取少许残渣于试管中，加8 mL水溶解，煮沸2 min，灭菌，冷却，各取1 mL， 分别注入6只青蛙腹中(每只重约35 g，雌雄各半)，6 min后青蛙相继出现四肢麻痹，8 min后呼吸困难死亡，解剖未见异常(空白对照组24 h未见异常)。
3．说明
①样品采集以当餐剩余的河豚鱼为宜。
②样液在加入乙酸铅后，通人H2S以除去多余的Pb，形成PbS沉淀；加H3PO4·12WO3以除去胆碱等物质的干扰。
注：华南标准物质网-国家标准物质采购平台
