维生素E又名生育酚,属于脂溶性维生素,是一组具有α一生育酚活性的化合物。食物中存在着α、β、γ、δ四种不同化学结构的生育酚和四种生育三烯酚,各种食物中它们的含量有很大差别,生理活性也不相同,其中以a一生育酚的活性最强,含量最多(约90%)。
维生素E广泛分布于动、植物食品中,含量较多的为麦胚油、棉子油、玉米油、花生油、芝麻油、大豆油等植物油料,此外肉、鱼、禽、蛋、乳、豆类、水果以及绿色蔬菜中也都含有维生素E。膳食中维生素E的活性以α一生育酚当量(α-TEs,mg)来表示,规定1mga-TE相当于1mg d-a一生育酚的活性。1个国际单位(IU)维生素E的定义是1mgd-α一生育酚乙酸酯的活性,1mgd-α一生育酚=1.49IU维生素E。
维生素E的测定方法有:比色法、荧光法、气相色谱法、液相色谱法等。比色法操作简单,灵敏度较高,但对维生素E没有特异的反应,需要采取一些方法消除干扰。荧光法特异性强、干扰少、灵敏、快速、简便。高效液相色谱法具有简便、分辨率高等优点,可在短时间完成同系物的分离定量,是目前测定维生素E最好的分析方法。这里主要介绍荧光法。
样品经皂化、提取、浓缩蒸干后,用正己烷溶解不皂化物,在295nm激发波长,324nm发射波长下测定其荧光强度,并与标准α一维生素E作比较,即可计算出样品中维生素E的含量。
样品中维生素E含量根据下列公式计算:
X=[(U×c×V)/S×m]×(100/1000)
式中:X—样品中α一维生素E的含量,mg/100g;
U—样品溶液的荧光强度;
c—标准使用液的浓度,μg/mL;
V—样品稀释体积,mL;
S—标准使用液的荧光强度;
m—样品的质量,g。
说明及注意事项如下。
(1)对于α一维生素E含量高的样品,此方法灵敏度较比色法高得多;对于植物性样品,一般α一维生素E含量不多,而其他异构体含量较多。每一种同系物的激发波长和发射波长的荧光强度不尽相同,因此测定值多数不能代表真实值,测定误差较大。特别是当含有大量S一维生素E时,测定值比真实值高得多,因为S体的荧光强度比a体强70%.
(2)荧光法测定的样品为花生油,如测其他食品,需先抽提脂肪。经抽提脂肪后的样品其发射波长改为330nm。