1．仪器
HPLC仪(具紫外检测器)。
2．试剂
①无水乙醇。
②10％酒石酸液。
③石油醚。
④NH4OH液。
⑤氯仿+异丙醇(3+1)。
⑥无水Na2SO4。
⑦乙氰。
⑧0．02mol·L-1KH2PO4。
⑨0．002mol·L-1K2HPO4。
⑩吗啡、罂粟碱、可待因、那可丁标准贮存品(中国药品生物制品检定所)。
⑩吗啡、罂粟碱、可待因、那可丁标准贮存液(100µg／mL)。
⑥吗啡、罂粟碱、可待因、那可丁标准应用液(10µg·mL-1)。
3．仪器工作条件
①紫外检测器(波长254nm)。
②灵敏度0．02AUFS。
③色谱柱[C18柱(25cm×4．6mm)，粒径10µm]。
④流动相：a．乙腈；b．0．02mol·L-1KH2PO4+0．002mol·L-1K2HPO4(梯度洗脱)。
4．检测步骤
取500mL样品于锥形瓶中，加热煮沸至20mL，冷却，加无水乙醇60mL，用10％酒石酸液调pH为4，低温回流30min，趁热过滤，用酸性乙醇洗瓶，过滤，合并于另一锥形瓶中，在水浴上挥去乙醇呈浆液状，冷却，加少许水溶解，过滤于分液漏斗中，用10％酒石酸液洗瓶，过滤，一并收入提取液于分液漏斗中，用石油醚30mL×2，分2次脱脂，弃醚层。水层于另一分液漏斗中用NH3·H2O液调pH为9，用氯仿+异丙醇(3+1)30mL×3，分3次提取，弃水层。有机层于分液漏斗中用无水Na2SO4脱水于K-D浓缩器中，浓缩近干，用N2吹干，加流动相1mL溶解，并定容至1mL，0．45µm膜过滤，待检。取待检液10µL，注入HLPC仪。
5．标准定位与样品定性
若样液中出现与4个标准品保留时间近似，则可确认样液中含有罂粟成分。
6．计算
样液峰面积与标准液峰面积比较定量，公式参照气相色谱法。
7．说明
①本法采取梯度洗脱技术进行分离，其分离效果较好。流动相梯度，如15％0．2min、
15％～50％a14min、50％o-60％a6min、60%a5min。
②用无水Na2SO4脱水应彻底。
