引起食物中毒的是甲型链球菌，该菌产生溶血素等外毒素，人体摄人大量活菌可引起感染型食物中毒。主要症状为腹泻、腹痛、恶心、呕吐等急性胃肠炎。加热至60℃、30～60min可杀死该细菌。人和动物的带菌者常为污染的主要源。
1．常规培养法检验与鉴定
随机取样1～2g(mL)，接种于葡萄糖或血清肉汤增菌培养基内，37℃培养24～48h，如果样品污染严重，可接种于匹克增菌培养基内，37℃培养24～48℃h。如有菌生长可进行涂片，革兰氏染色和镜检，在视野中发现有革兰氏阳性球菌，便可进行分离培养和细菌鉴定：取一接种环的菌液，划线于2～4份血液琼脂平板上，分别使用需氧和厌氧培养，于37℃下经18～24h后，链球菌形成的菌落细小、圆形、突起、灰白色、半透明、表面光滑，在菌落周围发生约1mm宽，绿褐色的环便是a型溶血。如发生2～4mm宽、界限分明、无色透明的溶血圈，便是口型溶血。若菌落周围不发生溶血圈，便是y型溶血或-1做不溶血。然后再涂片染色镜检，若为革兰氏阳性球菌并呈链状排列时，再转接于血液琼脂平板上进行纯种分离。经分纯后，若为溶血菌落，但其镜检形态不典型而呈双球菌状态时，应进行肉汤培养，菊糖发酵胆汁溶菌试验，以便作肺炎链球菌的鉴别，还要进行生化反应和血清学鉴定。
2．生化反应试验
生化反应可将几种主要病原性链球菌加以区别、鉴定。
①a型溶血性链球菌与肺炎链球菌的生化鉴别
a．胆汁溶菌试验：取已培养18～24h的待检菌株液体培养液试管2支，每支约4mL，向其中一管加入1mL无菌胆汁，在37℃下60min后比较两管的浓度，若为a型溶血链球菌，则应变为混浊，若肺炎链球菌，则变为澄清。
b．菊糖发酵试验：肺炎链球菌可以分解菊糖，而a型链球菌则为阴性。
②肠道链球菌与其他链球菌的生化鉴别
a．生长试验：将待检菌株接种于6．5％的氯化钠葡萄糖肉汤、pH9．6葡萄糖肉汤、0．1％的美蓝牛乳和40%胆汁葡萄糖肉汤培养基内，37℃培养箱内培养，肠道链球菌均能生长。
b．耐热试验：将待检菌株接种于0．5％的葡萄糖肉汤，在60℃水浴中经30min加热处理后，再放入37℃培养箱内培养，肠道链球菌仍有活力。
c．培育试验：将待检菌株接种于0．5％的葡萄糖肉汤2支，分别放于10℃和45℃下培养24h后观察，肠道链球菌均应发育生长。
3．毒力试验
口型溶血性链球菌的毒力试验可用动物试验和链激酶试验。
①动物试验：取分离纯菌接种于葡萄糖肉汤中，于37℃培养24h，取出0．2mL接种于小白鼠腹腔内，如发病死亡即进行解剖取其心血接种于葡萄糖肉汤培养基内，37℃培养18～24小时后，观察有无试验菌生长。
②链激酶试验：致病性溶血链球菌能产生链激酶(溶纤维蛋白酶)，此酶可激活正常人畜血液中的血浆蛋白酶原，使血浆蛋白酶溶解纤维蛋白。
取草酸盐血浆0．2mL(草酸钾0．01g，加入血液5mL，混匀，经离心沉淀，除去血球而得)，用生理食盐水稀释，再加入18～24h的链球菌肉扬培养物0．5mL，0．25％氯化钙溶液0．25mL，摇匀，放在37℃水浴中，每隔数分钟观察一次，注意血浆是否凝固(通常约10min即可凝固)。血浆凝固后，再注意观察及记录溶化的时间，一般说来，溶化的时间愈短，表示该菌产生的链激酶越多。溶化快的在20min内可将凝固的血浆完全溶化，如果20min后没有变化则在水浴中持续2h再观察。2h后将试管放于37℃保温箱内继续观察，以24h记录作为最后结果。如凝块全部溶化为+，24h不能溶化凝块者为－。
4．血清学鉴定
①分群鉴定：将分离出来的纯菌株，用热盐酸法提取链球菌的C多糖体作为群抗原，与群抗血清作沉淀反应试验，即为分群鉴定。
a．多糖体群抗原的制备：将分离出来的纯菌株，接种于5％兔或羊血清肉汤管(约5mL)内，37℃培养6h，再接种于100mL0．2％的葡萄糖肉汤培养基，培养24h后，离心沉淀，将沉淀物用生理盐水洗两次，然后悬浮于0．05mol·L-1盐酸溶液内，放沸水浴中15min取出。离心沉淀，取其上清液，加入溴麝香草酚蓝指示剂1滴，并用0．2mol·L-1氧氧化钠溶液中和，使溶液由黄变为浅绿色。若在中和时出现沉淀须离心除去沉淀物。该上清液即为C多糖体群抗原。
b．沉淀反应试验：该试验应在直径为2～4mm小试管内进行。先将群抗血清注入小试管内，再沿管壁徐徐注入上述盐酸提取物，必要时可将该抗原(提取物)用生理食盐水稀释为1：10，l：20，l：40，1：80，1：160等，稀释后使用。两液重叠后，12～15min观察结果，若为阳性结果，则在两液重叠面间出现明显的色环，无此色环者为阴性。
②分型鉴定：用上述分离出来的菌株纯培养物做抗原，与含有抗T物质的抗血清在玻片上进行凝集试验和分型鉴定。
a．T抗原制备：将在血清肉汤培养基中的培养转移到无盐肉汤培养基内，在22℃下培养48h后离心沉淀，弃去上清液，即为菌体抗原。
b．凝集试验：抗血清按1：10，1：100，1：200，1：400，1：800等稀释，然后在洁净的载玻片上，与上述制备的菌体抗原进行凝集试验，同时以生理食盐水作对照，若在混菌的血清中发生凝集现象即为阳性，对照者应为阴性。
