1.仪器
GC仪(具氢火焰离子化检测器)。
2.试剂
①石油醚(30~60℃)。
②吸附剂:硅胶及弗罗里硅土(60~80目)。
③二氯甲烷。
④CS2。
⑤无水Na2SO4。
⑥BHT、BHA标准贮备液(1.0mg·mL-1):称取BHT、BHA各0.1000g,用CS2溶解,并定容至100mL,冰箱保存。
⑦BHT、BHA标准应用液(0.04mg·mL-1):用CS2稀释。
3.仪器工作条件
①玻璃色谱柱:(2m×3mm),内填10%QF一1的GaschromQ(80~100目)担体。
②柱温140℃,进样口、检测器温度200℃。
③载气:N2(99.99%)流速40mL/min。
④进样量3µL。
4.检测步骤
①油脂:取油脂(高等)样50g、油脂(中等)样100g、油脂(低等)样300g分别于具塞锥形瓶中。依次加石油醚50mL、200mL、300mL,充分混溶,过夜,快速滤纸过滤,减压回收石油醚,脂肪残渣于锥形瓶中。称取脂肪残渣(0.5~1.0g)于烧杯中,加石油醚25mL溶解,移入层析柱中,用二氯甲烷淋洗5次,每次20mL,合并于K-D浓缩器中。浓缩近干,加CS2定容至2mL,待检。取待检液3µL注入GC仪(同时注入标准应用液3µL)。
②油:油样2g于具塞锥形瓶中。加石油醚30mL溶解,移人层析柱中,用二氯甲烷20mL,淋洗5次,合并于K-D浓缩器中。浓缩近干,加CS2定容至2mL,待检。待检液3µL注入GC仪(同时注入标准应用液3µL)。
5.计算
X=[(A1/A2)*CS*1000]/[m*(V2/V1)*1000]
式中:X——脂肪中BHT、BHA含量,mg·kg-1;
A1——样品峰面积,mm。;
A2——标准应用液峰面积,mm。;
Cs一一标准应用液含量,µg;
V1——样品液体积,mL;
V2——进样体积,mL;
m——样品质量,g。
6.说明
①玻璃活塞层析柱,一般长30cm、直径1cm,柱底放玻璃棉,两端各放少量无水Na2SO4,柱中填放硅胶6g及弗罗里硅土4g,用石油醚混合的吸附剂。
②抗氧化剂在层析柱中停留时间不宜过长,一般以72滴/min淋洗为好。
③本法适用于植物油、糕点、面包、饼干、蛋糕等样品检测。