纯净的山梨酸钠在254nm处有最大吸收峰。样品经三氯甲烷提取后,再以碳酸氢钠提取,使山梨酸形成山梨酸钠溶于水溶液中,测其吸光度即得。
1.主要仪器
紫外分光光度计。
2.主要试剂
①三氯甲烷:以三氯甲烷体积之半的碳酸氢钠(o.5m01.L-1)提取两次,而后以无水硫酸钠干燥,过滤备用。
②0.5mol·L-1碳酸氢钠:取21g碳酸氢钠溶于500mL水中。
③0.3mol·L-1碳酸氢钠。
3.操作步骤
①标准曲线的绘制:用0.3mol·L-1碳酸氢钠溶液和山梨酸配成0、1、2、3、4、5g·mL-1的标准溶液,于254nm波长下分别测其吸光度。以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘图,即可得山梨酸的标准曲线。
②样品溶液的制备:称取50.00g样品加350mL水于组织捣碎机中,粉碎5min,使成匀浆,用水稀释至500mL,摇匀。准确称取10g此匀浆,定量转移于50mL容量瓶中,以水定容,混匀。准确移取10mL此溶液于250mL分液漏斗中,用1.0mL氯仿提取1min。将氯仿层转至125mL锥形瓶中,内置5g无水硫酸钠,振荡后静置。
③样品中山梨酸的测定:移取上述的氯仿溶液50mL于125mL分液漏斗中,用25mL0.3mol·L-1碳酸氢钠提取lmin。静置分层后,小心放去氯仿层。取碳酸氢钠溶液层,于254nm处测其吸光度。从标准曲线找出其山梨酸的含量,即可算出样品中山梨酸的含量。
4.计算
山梨酸含量(µg·g-1)=(从标准曲线上查得三梨酸钾的含量×稀释倍数)/样品重(g)