全自动生化分析仪发展迅速,具有多项目、多样本的处理能力,检测速度不断提高,但由于共用吸样针、试剂针、搅拌棒以及比色杯,当生化仪长期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化仪内污垢的积聚、测试顺序安排不当,且常规清洗不能有效消除交叉污染时,就会增加试剂间化学污染的可能性,引起测定结果偏高或偏低[1]。在日常工作中,我们发现尿酸、葡萄糖试剂与肌酐 ( CR) 试剂相邻时,可造成肌酐测定结果偏高,考虑可能为试剂之间的交叉污染。为此,我们用迈瑞 800 全自动生化分析仪进行了相关实验,并探讨了避免交叉污染的方法。
1 材料与方法
1. 1 仪器与试剂 迈瑞 800 全自动生化分析仪。尿酸 ( 酶法) 、葡萄糖 ( 氧化酶法) 和肌酐 ( 氧化酶法) 试剂均匀为浙江伊利康生物技术有限公司产品。
1. 2 标本 随机选择 CR 测定范围在 40 ~ 120μmol / L 和 200 ~500μmol / L 之间的血清标本制成两份混合人血清,分别代表低值、高值。
1. 3 统计学方法 应用 SPSS 11. 0 软件处理数据。计量资料以 ( x ± s) 表示,采用配对 t 检验,以 P <0. 05 为差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 项目间交叉污染实验 用自动生化分析仪将两份混合人血清重复测定 20 次,单独测定肌酐组结果分别为 ( 74 ± 7)μmol/L、( 312 ± 8) μmol/L,然后先测定尿酸后测定肌酐组结果为 ( 131 ±6) μmol/L、( 409 ± 4) μmol/L,先测定葡萄糖后测定肌酐组结果为 ( 182 ±8) μmol/L、( 528 ±5) μmol/L。先测尿酸和葡萄糖后测肌酐,其肌酐值与单独测得肌酐值比较差异有统计学意义 ( P <0. 01) 。
2. 2 交叉干扰的排除 尿酸、葡糖糖与肌酐试剂相邻时,在尿酸与肌酐、葡糖糖与肌酐之间任意穿插其他项目 ALT、AST、BUN ( UA - ALT - AST - BUN - CR、GLU - ALT - AST -BUN - CR) 测定肌酐,两组低值和高值结果分别为: ( 77 ± 6)μmol/L、( 308 ± 6) μmol/L 和 ( 75 ± 5) μmol/L、 ( 318 ± 8)μmol/L,差异无统计学意义 ( P > 0. 05) 。
3 讨论
随着全自动生化分析仪在各级医院的普及,给临床检验工作带来方便,提高工作效率,但是如果由于对生化仪保养不当时往往会导致仪器的清洗能力下降,比色杯老化后引起吸附能力下增强,生化仪内灰尘及污物的积聚等均会增加仪器及试剂间交叉污染的可能性,引起测定结果不准确。根据多年的使用经验,认为试剂间的交叉污染对测定结果影响最大,
这些干扰主要有以下几个方面:
( 1) 试剂中含有高浓度的被干扰项目的待测物;
( 2) 试剂成分参与反应: 上一个试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用,因而干扰下一反应的测定结果。
( 3) 反应进程相同: 上一个试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来间接的干扰,下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果;
( 4) 改变了下一个测定项目的最适 pH 值测定环境。
在本实验中,尿酸、葡萄糖反应产物均有过氧化氢,而肌酐测定试剂必须使用过氧化氢酶,使用如前面的尿酸、葡萄糖等 Trinders 反应而产生过氧化氢的测试项目,测会消耗部分过氧化氢酶,导致肌酸和肌氨酸不能有效消除,使测定结果偏高,其次肌酐也是以 Trinders 反应产生颜色改变进行测定,必然受到尿酸、葡萄糖的带来的严重干扰。当改变仪器检测顺序,在尿酸、葡萄糖与肌酐之间任意穿插其他项目进行检测时,所得结果与对照组比较无显著性差异。解决以上自动生化分析仪试剂针携带污染所致的干扰方法有:
( 1) 安排项目顺序时要求两个项目间至少要有一个非干扰项目,或将被干扰项目放在干扰项目之前;
( 2) 设定试剂针、样品针和反应杯的补充清洗程序,从而大大减低试剂之间的交叉污染。