【实验器材】
(1)仪器 电子天平、烧杯、磁力搅拌器、容量瓶、灭菌过滤器、移液器及配套枪头等。
(2)材料滤纸、称量纸、滤膜。
(3)试剂各种抗生素、新鲜制备的三蒸水或Hank’s液等。
【操作方法与步骤】
(一)青霉素、链霉素(双抗)液的配制和使用
(1)用l0mL Hank’s液或三蒸水溶解100万U的硫酸链霉素,用8 mL 硫酸链霉素液溶解80万U青霉素粉,即成每毫升青霉素、链霉素各10万U的母液。
(2)使用时,在100mL培养基内加母液0.1 mL,则培养基内青霉素、链霉素最终使用浓度为每毫升100U。
(二)卡那霉素液的配制和使用
(1)将1瓶卡那霉素(50 000μg/瓶)溶于5 mL Hank’s液中,即成10 000μg/mL的母液。
(2)使用时每100mL培养基内加0.5 mL母液,即每毫升培养液内最终使用浓度为50μg/mL。
(三)制霉菌素液的配制
因制霉菌素不能溶于水,故只能制成5 000μg/mL的悬液,使用时每100 mL培养基内加0.5 mL悬液,即每毫升营养液内含25μg的制霉菌素。
配制的制霉菌素宜用小瓶分装,低温冻存保存,用时每瓶一次用完。