1.仪器
①荧光光度计。
②免疫亲和柱(美国VICAM公司)。
2.试剂
①甲醇。
②0.002％NaCl。
③0.0l％溴液。
④荧光光度计校准液：称取二水硫酸奎宁3.40 g，用0.05mol·L H2S04定容至100 mI。
3.检测步骤
①样品前处理：准确称取样品(25 g)于具塞锥形瓶中，加。NaCl 5 g、甲醇+水(7+3)125 mI。，均匀2 min，过滤于锥形瓶中，取滤液20 mL于锥形瓶中，加水20 mL，混匀，用玻纤滤纸过滤2次。免疫亲和柱连于10 cm玻璃针筒下，加滤液10 mL注人玻璃针筒中，以6 mL／min流速过柱，流尽后，用10 mI。×2水淋洗柱，弃流出液，加甲醇10 mI。洗脱，流速2 mL／min，收集于比色管中待检(同时做空白试验)。
②荧光光度计比色：将待检液比色管中加0.01％溴液1 mL，混匀，静置卜min，用荧光光度计比色测定，自动报数。
4.说明
①免疫亲和技术是利用免疫化学原理，用大剂量单克隆抗体，选择性吸附提取液中的抗原物质AFT。
②本法采用免疫亲和柱，解决了样品净化问题。
③本法采用二水硫酸奎宁作为校准液，避免了工作人员对AFT标准品的接触，对工作人员安全健康有了可靠保证。
