嘌呤碱或嘧啶碱具有共轭双键，使核苷酸和核酸在紫外光区具有特征性的吸收光谱，最大吸收峰在260nm。比色杯光径1cm，波长260nm，1个吸光度值(A)相当于50µg/mL双螺旋DNA；40µg/mL单螺旋DNA或RNA；20µg/mL寡核苷酸。
(一)DNA的浓度测定
1.取DNA溶液l0µl，加双蒸馏水600µl(即稀释61倍)。
2．用双蒸馏水调零，测定260nm和280nm的吸光度值(A260，A280)。
3．DNA浓度（µg/µl）=（A260×50×61）÷1000
4．DNA的纯度A260/A280的比值应大于1．7。若样品中含有蛋白质(吸收峰在280nm)等杂质时，比值下降，应重新纯化。有时测定A230，A260/A230的比值应大于2．0，如比值太小，说明样品中残存酚等有机杂质。
5．DNA溶液需经一定比例稀释，不可太浓。否则，因溶液黏稠，加样器不易吸准。
(二)RNA的浓度测定
1．取RNA(溶于5g/L。SDS溶液中)溶液10µl，加入三蒸馏水500µl中(稀释5l倍)。
2．将5g/LSDS用三蒸馏水做51倍稀释，用此液调零，测定RNA稀释液在260nm和280nm的吸光度(A260、A280)。
3．RNA浓度（µg/µl）=(A260×40×51)÷1000
4．RNA纯度纯的RNA，A260/A280=2.0。由于所用的标本不同，比值在1．7～2．0之间可以接受。如低于此范围，往往是由于蛋白质的污染。有时，RNA样品的A260/A280可大于2.0。低于此值则表示有异硫氰酸胍的污染。应再经异戊醇沉淀，以除去小分子胍类的污染。
