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常用维生素检测

  • 发布日期:2016/9/19 14:08:22 阅读次数:1407
  •     近年来,随着研究和临床观察的深入发展,人们对某些维生素的本质和作用有了进一步的认识。在一般情况下,机体通过进食获得维生素,以满足身体的需要。但是,由于人们的生活、饮食、习惯、身体状况的不同,可以导致食物中的维生素含量不足,吸收、利用发生障碍,或者额外增加对维生素的需求,从而出现维生素缺乏症。或由于摄入过量而导致疾病。因此,定期对患者体内维生素含量进行监测是非常必要的,目前常用的维生素检测方法有比色法、色谱法、荧光法、微生物法等。

    (一)维生素A

        测定血清视黄醇可评价维生素A的营养状况。测定视黄醇的最常用方法有分光光度法、荧光测定法及高效液相色谱法(HPLC)。

    【检测方法】三氯化锑比色法测定维生素A。维生素A与三氯化锑在三氯甲烷中作用,产生蓝色物质,其颜色深浅与溶液中维生素A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定,但在规定时间内可用分光光度计于620nm处测定其吸光度。

    【参考区间】血清维生素A含量小于20ug/L为缺乏,20~30ug/L为可疑缺乏。

    【评价】比色法适用于样品中含维生素A高的样品,快速、方法简便、结果准确,样品用量少,最低检出量0.8ng。

    (二)维生素E

        血清、红细胞、血小板和淋巴细胞中均可测到维生素E,最常用的标本是血清。最常用的方法是荧光测定法和高效液相色谱法。

    【检测方法】荧光测定法测定维生素E。利用维生素E的共轭双键体系,在一定波长光照射下可产生荧光,其荧光强度与浓度成正比。

    一125—

    【参考区间】成人血清维生素E(26.30+5.15)umol/L。

    【评价1①样品中与其他维生素共存的维生素E,用荧光法可不分离直接测定混合物中的维生素E;②该法操作简便,灵敏度高,结果准确,是血清维生素E检测较为理想的方法。维生素E含量在46.44mol/L以下时,校正曲线线性良好,丫:0.9999,平均回收率为103.6%,批内CV为2.22%,批间CV为4.38%。

    (三)维生素C

        许多分析方法适用于维生素C营养状况的检测,最常用的方法是分光光度法和高效液相色谱法。

    【检测方法1直接碘量法测定维生素C。维生素C分子式为C6H8O6,分子量为176.1。用Iz标准溶液直接滴定,I1将维生素C分子中的烯醇式结构氧化为酮式结构(图6—1)。



    图6-1 I2氧化维生素C

        根据I2标准溶液的浓度和消耗的体积,计算样品中维生素C的含量。用这种方法,不仅可以测定药片中维生素C的含量,还可以测定血液、注射液、水果及蔬菜中维生素C的含量。

        由于维生素C在空气中易被氧化,特别是在碱性介质中更易被氧化,故在测定时加入少量稀醋酸使溶液呈弱酸性,一般选在pH 3~4的弱酸性溶液中进行滴定。

    【参考区间】血清维生素C:28.4~79.5gmol/L(5~14mg/L),<1 1.4um01/L(2mg/L)可出现症状。24小时尿中维生素C含量<20mg可诊断为维生素C缺乏。

    【评价】①碘量法应用范围广,既可测定氧化性物质,又可测定还原性物质。其缺点是I2易被空气氧化和容易挥发;②碘量法测定维生素C的含量具有准确度高、精密度好、操作简便等优点。

    (四)维生素B2

        维生素B2结构中含核糖醇基与异咯嗪,在自然界中,维生素B2与磷酸结合,可形成黄素单核苷酸(FMN),FMN再与腺嘌呤核苷酸结合,形成黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)。维生素B、FMN和FAD都具有显示绿黄色荧光,本身黄色,荧光遇强酸或强碱减弱的特性。

    【检测方法1荧光法测定维生素B2。一定波长光照射维生素B2可产生荧光。在稀溶液中,其荧光强度与浓度成正比。

    【参考区间】血清维生素B。含量<1401【参考区间】成人血清维生素E(26.30+5.15)umol/L。

    【评价1①样品中与其他维生素共存的维生素E,用荧光法可不分离直接测定混合物

    中的维生素E;②该法操作简便,灵敏度高,结果准确,是血清维生素E检测较为理想的

    方法。维生素E含量在46.44mol/L以下时,校正曲线线性良好,丫:0.9999,平均回收率为

    103.6%,批内CV为2.22%,批间CV为4.38%。

    (三)维生素C

        许多分析方法适用于维生素C营养状况的检测,最常用的方法是分光光度法和高效液相色谱法。

    【检测方法1直接碘量法测定维生素C。维生素C分子式为C6H8O6,分子量为176.1。用I2标准溶液直接滴定,I2将维生素C分子中的烯醇式结构氧化为酮式结构(图6—1)。



    图6-1 I:氧化维生素C

    根据I2标准溶液的浓度和消耗的体积,计算样品中维生素C的含量。用这种方法,不仅可以测定药片中维生素C的含量,还可以测定血液、注射液、水果及蔬菜中维生素C的含量。

    由于维生素C在空气中易被氧化,特别是在碱性介质中更易被氧化,故在测定时加入少量稀醋酸使溶液呈弱酸性,一般选在pH 3~4的弱酸性溶液中进行滴定。

    【参考区间】血清维生素C:28.4~79.5gmol/L(5~14mg/L),<1 1.4um01/L(2mg/L)可出现症状。24小时尿中维生素C含量<20mg可诊断为维生素C缺乏。

    【评价】①碘量法应用范围广,既可测定氧化性物质,又可测定还原性物质。其缺点是I2易被空气氧化和容易挥发;②碘量法测定维生素C的含量具有准确度高、精密度好、操作简便等优点。

    (四)维生素B:

    维生素B2结构中含核糖醇基与异咯嗪,在自然界中,维生素B2与磷酸结合,可形成黄素单核苷酸(FMN),FMN再与腺嘌呤核苷酸结合,形成黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)。维生素B2、FMN和FAD都具有显示绿黄色荧光,本身黄色,荧光遇强酸或强碱减弱的特性。

    【检测方法1荧光法测定维生素B2一定波长光照射维生素B2可产生荧光。在稀溶液中,其荧光强度与浓度成正比。

    【参考区间】血清维生素B2含量<140/L为缺乏,>200【参考区间】成人血清维生素E(26.30+5.15)umol/L。

    【评价1①样品中与其他维生素共存的维生素E,用荧光法可不分离直接测定混合物中的维生素E;②该法操作简便,灵敏度高,结果准确,是血清维生素E检测较为理想的方法。维生素E含量在46.44mol/L以下时,校正曲线线性良好,-0.9999,平均回收率为103.6%,批内CV为2.22%,批间CV为4.38%。

    (三)维生素C

    许多分析方法适用于维生素C营养状况的检测,最常用的方法是分光光度法和高效液

    相色谱法。

    【检测方法1直接碘量法测定维生素C。维生素C分子式为C6H8O6,分子量为176.1。

    用I2标准溶液直接滴定,I2将维生素C分子中的烯醇式结构氧化为酮式结构(图6—1)。


    图6-1 I2氧化维生素C

    根据12标准溶液的浓度和消耗的体积,计算样品中维生素C的含量。用这种方法,不仅

    可以测定药片中维生素C的含量,还可以测定血液、注射液、水果及蔬菜中维生素C的含量。

    由于维生素C在空气中易被氧化,特别是在碱性介质中更易被氧化,故在测定时加入

    少量稀醋酸使溶液呈弱酸性,一般选在pH 3~4的弱酸性溶液中进行滴定。

    【参考区间】血清维生素C:28.4~79.5gmol/L(5~14mg/L),<1 1.4umol/L(2mg/L)可

    出现症状。24小时尿中维生素C含量<20mg可诊断为维生素C缺乏。

    【评价】①碘量法应用范围广,既可测定氧化性物质,又可测定还原性物质。其缺点是I2易被空气氧化和容易挥发;②碘量法测定维生素C的含量具有准确度高、精密度好、操作简便等优点。

    (四)维生素B2

    维生素B2结构中含核糖醇基与异咯嗪,在自然界中,维生素B2与磷酸结合,可形成黄素单核苷酸(FMN),FMN再与腺嘌呤核苷酸结合,形成黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)。维生素B2、FMN和FAD都具有显示绿黄色荧光,本身黄色,荧光遇强酸或强碱减弱的特性。

    【检测方法1荧光法测定维生素B2一定波长光照射维生素B2可产生荧光。在稀溶液中,其荧光强度与浓度成正比。

    【参考区间】血清维生素B。含量<140ug/L为缺乏,>200ug/L为良好。

    【评价1分子荧光光谱法具有灵敏度高和选择性好的特性。其检测下限通常可达0.1~0.001ug/ml

    一126—


         总之,维生素的检测可以用分光光度法、荧光测定法和HPLC等进行检测,也可以通过

    以乳酸菌为主的微生物定量法。


    注:华南标准物质网-国家标准物质采购平台

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