设为首页加入收藏您好,欢迎来到广州分析测试中心科力技术开发公司!
 购物车(0)   [免费注册]  [会员登录]  联系我们 | 在线留言
热门关键字:国家标准物质环境标准样品标准溶液化学对照品进口标准品天然产物对照品药品对照品
订购产品/资料中心:

新闻中心

news

联系我们

contact us
  • 广州总部
  • 地址:广州市先烈中路100号大院37号楼214室(广东省科学院内)
  • 电话(总机):020-87684186 
  • 联系QQ:中广测标准品 2216645544
  • 销售部(分机): 
  • 广东省/港澳地区: 605、607、609
  • 全国(广东省以外) :604、608
  • 市场部(分机):615、616
  • 采购部(分机):601、602
  • 进出口(分机):612、613
  • 传  真(分机): 606 
您的位置:首页 >> 新闻中心 >> 技术中心

技术中心

食品中合成着色剂的测定

  • 发布日期:2016/9/18 10:31:43 阅读次数:1683
  • 一、前言


        食用合成色素已列入GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》。目前,食品中合成色素的检测方法(GB/T5009.35-2003)是:先将样品中合成色素用聚酰胺粉吸附,然后在碱性条件下解吸附,再用液相色谱法进行分离后与标准品比较定性、定量。本方法利用SPE小柱选择分离性强的特点,通过小柱吸附色素,然后去掉干扰物,解析定容后采用液相色谱定性、定量。本法较之于国标法,前处理简单快速,回收率高。


    二、试剂


    1.甲醇:色谱纯

    2.氨水:分析纯

    3.氨化甲醇溶液(2%):准确量取2mL氨水和98mL甲醇混匀备用。

    4.乙酸铵(0.02mol/L):称取1.54g乙酸铵,加水溶解,定容至1000mL,经0.45μm过滤器过滤。

    5.石油醚:沸程为60℃~90℃。

    6.固相萃取柱:StrataX-AW60mg/3mL。使用前依次用3mL甲醇、3mL水活化并保持湿润。

    7.合成色素标准溶液

    (1)胭脂红:1000μg/mL;苋菜红:1000μg/mL;柠檬黄:1000μg/mL;日落黄:1000μg/mL;亮蓝:1000μg/mL,以上均由中国计量科学研究院化学所研制。

    (2)诱惑红标准物质为固体粉末,称量0.1000g,置于100mL容量瓶中,加水定容至刻度。此浓度为1000μg/mL。

    (3)标准储备液:临用前吸取上述色素溶液各10mL至100mL容量瓶,再用水定容,此为使用液,各色素浓度均为100μg/mL。

    三、仪器


    1.高效液相色谱仪:Agilent1100(配有紫外检测器)。

    2.电子天平:感量为0.1mg。

    3.高速离心机:4000r/min。

    4.匀浆机。

    5.超声波清洗器。

    6.氮吹仪。

    7.固相萃取装置。

    8.漩涡混合器。

    四、操作方法


    1.样品处理

    (1)饮料类样品:吸取10.0mL样品于25mL比色管中,含二氧化碳的样品需超声振荡驱除二氧化碳。

    (2)配制酒类样品:吸取10.0mL样品于25mL比色管中,水浴加热驱除乙醇。

    (3)硬糖、淀粉软糖、蜜饯类样品:称取5.0g粉碎的样品于25mL比色管中,加10mL水,60℃水浴温热溶解,过滤备用。

    (4)其他固体样品

    ①香肠、午餐肉等肉制品:称取5.0g粉碎均匀的样品于25mL比色管中(如脂肪含量较高,需加10mL石油醚萃取除去脂肪),加10mL水,匀浆、超声提取10min,离心后过滤,收集滤液。

    ②糕点类及一般固体样品:称取5.0g粉碎均匀的样品于25mL比色管中(如脂肪含量较高,需加10mL石油醚萃取除去脂肪),加10mL水,漩涡震荡2min,超声提取10min,离心后过滤,收集滤液。

    2.净化

    将上述滤液,置于80℃水浴中浓缩至约2mL,然后将处理后所得的溶液全部转移至固相萃取柱中,依次用3mL甲醇、3mL水洗涤,弃去全部流出液,抽至近干时,用5mL氨化甲醇溶液洗脱。注意:整个过程控制流速不超过1mL/min。将洗脱溶液置于氮吹仪上,用50℃氮气吹干,再用1mL水溶解,漩涡混合1min,经0.45μm过滤器过滤后备用。
    3.高效液相色谱测定

    (1)色谱条件

    ①色谱柱:ZORBAXSB-C185μm4.6×250mm

    ②流动相:甲醇-乙酸铵溶液(0.02mol/L)。

    ③梯度洗脱:梯度洗脱条件如表1所示。


    缺插图!


    <CTSM>表1梯度洗脱条件</CTSM>

    ④进样量:20μL。


     

    ⑤柱温:23℃,波长254nm。

    (2)测定


     

    6种合成着色剂标准品的液相色谱图如图1所示。


    缺插图!


    <CTSM>图16种着色剂标准样品色谱图</CTSM>


    (3)根据保留时间定性,外表峰面积定量,计算:


     

    X=(C×V×1000)/(m×1000)

    式中:X——样品中色素的含量,mg/kg;C——测定用样液中色素的含量,μg/mL;m——样品质量,g;V——样品定容后总体积,mL。


    五、样品的线性范围、检出限、回收率以及精密度


        将标准储备液稀释成(单位:μg/mL)0.100、0.200、0.400、1.00、3.00、5.00的标准系列,经0.45μm过滤器过滤后,在液相上进行定量分析得出回归方程和线性范围并计算出检出限,如表2所示。


    缺插图!


    <CTSM>表2回归方程、线性范围及检出限</CTSM>


    选择果味饮料、蜜饯、火腿肠、烤蛋糕4种不同样品,添加5.0mg/kg标准样品,扣除空白后计算出回收率。同时选取蜜饯,连续测定5次,计算出精密度,具体结果如表3、表4所示。


    缺插图!


    <CTSM>表3不同产品添加相应着色剂的回收率</CTSM>


    缺插图!


    <CTSM>表4同一样品添加后连续测定5次的精密度</CTSM>


    六、结果讨论



    1.本方法在前处理方面与国标检验方法比较:因为采用SPE小柱对着色剂进行了有效的吸附分离,所以前处理所需的时间和步骤均明显优于国标,节省了大量的人力和物力。

    2.本方法回收率方面与国标检验方法比较:本方法着色剂回收率基本控制在91%~98%之间,回收率较高,精密度均小于5%。而国标聚酰胺粉吸附法回收率基本在80%~90%之间,所以本方法在回收率方面优于国标法。

    3.目前,国标(GB/T5009.141-2003)诱惑红检测采用的纸色谱法,前处理为聚酰胺粉吸附,检出限为25mg/kg,本方法在前处理和检出限方面都明显优于国标。


        原子荧光标准溶液的配制是一个稀释的过程,即将购买的高浓度的标准溶液按要求、比例稀释到所需浓度,使之成为一个浓度序列,检定测得的原子荧光值呈线性关系。所以,溶液配制得好坏将直接影响到检定结果的准确性。因为砷、锑的测定条件基本相同,所以此两种元素可以同时测定。因此,JJG939-2009《原子荧光光度计》检定规程要求配制的是两种元素的混合标准溶液。JJG939-2009中所提供的检定用试剂和溶液配制方法比较简单,下面就原子荧光光度计检定用标准溶液的配制、保存及注意事项进行总结讨论。


    一、原子荧光光度计检定所需试剂及其性质


    1.盐酸:优级纯(GR)

        浓盐酸为无色或微黄色易挥发液体,有刺激性气味。能与水混溶,溶于碱液。对其的操作应在通风橱中进行。

    2.硼氢化钾(硼氢化纳)

        纯度不低于95%。白色至灰白色细结晶粉末或块状,吸湿性强,因此需与干燥剂一起存放。能溶于水、液氨,不溶于乙醚、苯、烃类,性质稳定,还原性强,其溶液在此主要作为还原剂使用。因为硼氢化钾溶液见光易分解,其溶液需用棕色瓶避光保存。

    3.氢氧化钾(氢氧化钠)

        分析纯(AR)是用来保护硼氢化钾的。常温下是一种白色晶体,具有吸水性、强腐蚀性;易溶于水,同时放出大量热。

    4.硫脲:分析纯(AR)

        白色光亮苦味晶体,能溶于冷水、乙醇,微溶于乙醚,20℃时在水中的溶解度为137g/L。有毒性,接触皮肤会吸收,因此配制溶液时应避免与皮肤接触。

    5.二次去离子水

        指去离子水经过亚沸蒸馏得到的水,一般用在物化或分析试验中。其中,用离子交换法制备的水被称为去离子水,去离子水不是没有离子的水,而是经过离子交换得到的没有干扰离子、pH值为中性的水(干扰离子一般指钙、镁、碳酸根、硫酸根等,但是去离子水一般含有的有机物质是不能去除的)。去离子水不同于蒸馏水,蒸馏法只能除去水中非挥发性的物质,并不能除去溶解在水中的气体,蒸馏水纯度一般不如去离子水,去离子水比蒸馏水电导率更小。通常情况下,普通定量分析蒸馏水就可以,仪器用水一般根据结果量级选择用水,最低标准是去离子水,这里因为结果量级比较高,因此使用的是二次去离子水。

    6.标准溶液

        砷标准原液(GBW08611,1000μg/mL,U=1μg/mL,k=2,中国计量科学研究院)、锑(GBW(E)080545,100μg/mL,U=1%,k=2)。


    二、原子荧光光度计检定用试剂配制所需设备


     

    1.天平:最大秤量为200g或500g,分度值不大于0.1g。


     

    2.玻璃量具(A级):100mL、200mL、1000mL容量瓶数个;100mL、500mL烧杯数个;1mL、5mL、10mL、20mL移液管或吸量管数个;玻璃棒。


     

    3.其他实验用器具。

    三、原子荧光光度计检定用试剂配制、保存及注意事项


    1.原子荧光光度计检定用试剂的作用原理

    JJG939-2009规定要配制的是砷、锑混合标准溶液。测定砷和锑的关键是将As(Ⅴ)、Sb(Ⅴ)还原为氢化物。As(Ⅴ)、Sb(Ⅴ)与硼氢化钾反应的时间较长,As(Ⅲ)、Sb(Ⅲ)更容易形成氢化物。前处理应将五价砷、锑先还原为三价,因此需要加入硫脲和抗坏血酸进行预还原。JJG939-2009规定,配制标准溶液时需加入100g/L的硫脲水溶液,未提到抗坏血酸,是因为抗坏血酸的作用是使溶液更加稳定并促进还原,硫脲的作用是还原和对Cu2+、Co3+、Ni2+等离子起掩蔽作用,硫脲和抗坏血酸在一起还原效果更好。按照JJG939-2009的要求,配制的标准溶液需要现用现配,则抗坏血酸的添加与否基本无影响。

    进行分析时,在酸性环境条件下同时加入硼氢化钾溶液,发生以下反应:

    NaBH4+3H2O+HCl→H3BO3+NaCl+8H→EHn+H2 (过量)

    (2+n)H+Em+→EHn+H2

    E为可形成氢化物元素(砷、锑),m可以等于或不等于n

    形成的氢化物被原子化后,受光源光能所激发发生跃迁到较高能级,并在回到较低能级的同时辐射出原子荧光。

        需要注意的是,硼氢化钾是强还原剂,在中性和酸性的情况下易分解,与水或空气中的氧气和二氧化碳反应,见光易分解。在溶液中加入氢氧化钾可使其较稳定地存在,保持低温可减缓它的分解。同时,氢氧化钾容易与玻璃中的硅发生反应生成硅酸钠,因此配好的溶液要用塑料瓶子进行保存,以保持溶液的有效浓度。如现用现配,在玻璃器皿中影响不大。

    2.原子荧光光度计检定用试剂的配制

    (1)100g/L的硫脲溶液的配制

    以配制100mL的溶液为例。在分析天平上称量10g硫脲(白色晶状固体,放在小烧杯中用差重法称量),用少量二次去离子水溶解,玻璃棒轻轻搅动,如溶解不完全可适当水浴加热,但不可温度过高。用玻璃棒将溶解的硫脲溶液移入100mL的容量瓶中定容。硫脲溶液配制中,可加入抗坏血酸,亦可不加。

    (2)100ng/mL的砷、锑标准储存液的配制

        逐级稀释法,可以降低误差,提高准确性。所以在稀释砷、锑标准溶液时,分两步稀释,以得到标准储存液。用移液管或吸量管分别吸取砷标准溶液1mL、锑标准溶液10mL溶于100mL的容量瓶中,用二次去离子水定容,配制成10μg/mL的砷、锑标准中间液。再吸取1mL配制好的10μg/mL的砷、锑标准中间液于100mL容量瓶中,用二次去离子水定容。

    (3)检定用砷、锑标准混合溶液的配制

    用移液管或吸量管分别吸取100ng/mL砷、锑标准储存液0mL、1.0mL、5.0mL、10.0mL、20.0mL于100mL容量瓶中,分别加入100g/L的硫脲溶液20mL、浓盐酸10mL,用二次去离子水稀释至刻度。

    (4)5%盐酸溶液的配制

    用量筒量取50mL的浓盐酸,加入约200mL二次去离子水稀释,然后移入1000mL的容量瓶中,用二次去离子水定容。

    (5)硼氢化钾溶液的配制

        硼氢化钾的浓度由被测元素浓度确定,载液酸浓度由硼氢化钾的浓度确定,最终废液呈酸性。日常检定中,配制1.5%的硼氢化钾溶液基本满足检定要求。具体配制方法是:在电子天平上称取15g硼氢化钾溶于预先加入5g氢氧化钾的200mL二次去离子水中,搅拌至溶解,用玻璃棒引流转移至1000mL容量瓶中,再用二次去离子水稀释至刻度。

    3.溶液配制中的注意事项

    (1)对溶液配制时所使用的玻璃量具根据分析方法的不同进行清洗。测定微量元素用的玻璃器皿,首先用毛刷蘸水刷洗,用水冲去可溶性物质及刷去表面黏附的灰尘,接着将滴管、吸量管、小试管等浸于10%硝酸溶液中8h以上,然后用纯水冲净。洗净的玻璃器皿倒置时,水流出后器皿壁应不挂水珠。至此再用少量纯水刷洗玻璃器皿3次,洗去自来水带来的杂质,自然沥干。

    (2)要注意配制的溶液的单位是质量浓度还是体积浓度。

    (3)固体试剂在烧杯中溶解后,用玻璃棒引流移入容量瓶,用二次去离子水少量多次清洗烧杯和玻璃棒,将清洗用水也倒入容量瓶,烧杯和容量瓶至少要清洗3~4次。

    (4)定容时,先加二次去离子水稀释至约3/4体积,再将容量瓶平摇几次(切勿倒转摇动),作初步混匀。接着将二次去离子水加至接近刻度处,再一点点加入,使溶液的凹面与容量瓶刻线相切。然后用玻璃塞塞好,来回颠倒容量瓶数次使溶液充分混合均匀。

    (5)使用移液管或吸量管量取试剂时,要先用欲取溶液淋洗2~3次后方可操作。

    (6)吸取溶液时,移液管或吸量管的下口插入欲取的溶液中不能太浅或太深,太浅会产生吸空,把溶液吸到洗耳球内弄脏溶液,太深又会使管外黏附过多溶液。

    (7)为减少测量误差,吸量管每次都应将最上面的刻度作为起始点,往下放出所需体积,而不是放出多少体积就吸取多少体积。除吹出式吸量管外,残留在吸量管末端的少量溶液,不可用外力强行使其流出。

    (8)容量瓶使用前要进行试漏,即在瓶内装入自来水到标线附近,盖上塞,用手按住塞,倒立容量瓶,观察瓶口是否有水渗出,如果不漏,把瓶直立后,转动瓶塞约180°后再倒立试一次。

    (9)不要用容量瓶长期存放配好的溶液,配好的溶液如果需要长期存放,应该转移到干净的磨口试剂瓶中。

    (10)容量瓶长期不用时应该洗净,把塞子用纸垫上,以防时间长后,塞子打不开。

    (11)还原剂浓度由试样来定,载流液浓度由还原剂浓度来定,最后废液呈酸性。如果不是酸性,硼氢化钾会在管道压力最低处沉淀,而后堵塞。

    (12)实验室内不能放置食物,以免交叉感染。

    (13)如对自己所配硼氢化钾溶液和载流液浓度存怀疑态度,可用pH试纸测试一下,如废液呈酸性,则满足实验要求;如废液呈碱性,则硼氢化钾溶液浓度过高。

    (14)标准储存液也可用5%盐酸来制备,溶液性质会更加稳定,可保存较长时间。

     

    4.原子荧光用溶液的保存

         除标准储存液在0~5℃条件下可保存6个月外,其他溶液最好现用现配。


    注:华南标准物质网-国家标准物质采购平台

首 页  |  公司简介  |  产品中心  |  检测仪器  |  分析测试  |  最新公告  |  新闻中心  |  在线订单  |  订货指南  |  联系我们 | BMAP | GMAP
广州分析测试中心科力技术开发公司版权所有@ Copyright 2012
国家标准物质网  顾客服务中心:020-87684186  www.gdgbw.com   【百度统计】
*本站相关网页素材及相关资源均来源互联网,如有侵权请速告知,我们将会在24小时内删除* 粤ICP备09211008号