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有机营养成分——组织培养的营养成分(三)

  • 发布日期:2016/12/8 15:39:12 阅读次数:1577
  • 有机营养成分主要包括碳源(糖类)和维生索类。

    虽然大多数培养物都能合成所有必需的维生素,但合成能力有限,其数量显然不足。为了能使组织很好地生长,在培养基中常常必须补加几种维生索和氨基酸。

    1.碳源

    植物组织在离体之后,难以依靠光合作用维持其生存,它所需要的碳是以各种糖的形式提供于培养基中,糖不仅为细胞提供合成新化合物的碳骨架,也为细胞的呼吸代谢提供底物与能源,另一重要的功能是调节培养基中的渗透压。常用的碳源是蔗糖,它具有热易变性,经高压灭菌后大部分分解为D-葡萄糖、D-果糖,只剩下部分的蔗糖,利于培养物的吸收。此外,葡萄糖和果糖也是较好的碳源,可支持许多组织很好地生长。淀粉对于含糖量较高的植物细胞组织培养有较好的效果。麦芽糖也可供许多植物细胞组织培养中应用,然而其他糖类对多数培养物的效果都不好。一般情况下,在组织培养中常用的蔗糖浓度为2%~5%。低浓度(1.5%~2.5%)的糖有利于木质部的生长,但过低则不能满足细胞营养、代谢和生长的需要;高浓度(3%一4%)糖则可促进韧皮部的生长,若质量分数过高,可能会干扰糖类物质的正常代谢,也可能导致培养物渗透压的增加,阻碍细胞对水分的吸收,若糖浓度居于两者之间(2.5%~3.5%)则同时对韧皮部和本质部生长都有利。但在幼胚培养、茎尖分生组织培养、花药培养和原生质体培养时,需要较高质量分数的糖,一般需10%左右或更高。对蔗糖的纯度来说,根据多年米经验及各地快速繁殖工作的实际效果来看,尽管糖在培养基中加入量很大,但蔗糖的纯度不一定要求很高,只要在培养基中没有毒害因素就可以。

    2.维生素类化舍物

    维生素(vitamin)类化合物在植物细胞里主要以各种辅酶的形式参与多项代谢活动,对生长、分化等有很好的促进作用。虽然大多数的植物细胞在培养中都能合成所有必需的维生素'但合成的数量不足,通常需加入一种或一种以上的维生素,以便获得最好的生长。硫胺素(维生素B1)一般认为是一种必需成分,在其他各种维生素中,还有吡哆醇(维生索B6)、烟酸(维生素B3,又称维生素PP)、泛酸钙(维生素B5),有的配方用了生物索(维生素H)、钴胺素(维生素B12)、叶酸(维生素Bc)、抗坏血酸(维生素C),都能显著地改善培养的植物组织生长状况。抗坏血酸有很强的抗氧化和还原能力,常用于防止组织氧化变褐,有时用量较高。其中维生素B1可全面促进植物的生长,维生素B6促进根的生长。维生素具有热易变性,易在高温下降解,可进行过滤灭菌。

    3.肌醇

    肌醇(化学名为环己六醇)能参与碳水化合物代谢、磷脂代谢等生理活动,帮助活性物质发挥作用,使培养组织快速生长,促进胚状体及芽的形成,培养基中肌醇用量一般为50~100 mg/L。

    4.氨基酸类及有机添加物

    氨基酸作为一种重要的有机氮源,除构成生物大分子(如蛋白质、酶、核酶)的基本组成外,还具有缓冲作用和调节培养物体内平衡的功能,对外植体芽、根、胚状体的生长、分化有良好的促进作用。常用的氨基酸有甘氨酸、谷酰胺、精氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、丙氨酸以及酰胺类物质等。这些氨基酸是很好的有机氮化合物,可直接被细胞吸收利用,而且功能各异。其中甘氨酸能促进离体根的生长,丝氨酸和谷氨酞胺有利于花药胚状体或不定芽的分化;半脱氨酸可作为抗氧化剂,防止培养材料褐化,延缓酚氧化。就维生素和氨基酸而言,各种标准培养基之间存在着很大的差异。

    此外,为了促进某些外植体的愈伤组织、器官、组织或细胞的生长,有时还使用很多种化学成分不明的复杂的营养混合物,如水解酪蛋白(CH)、椰子汁(CM)、马铃薯块、麦芽浸出物(ME)、苹果和番茄的果汁、黄瓜的果实、未熟玉米的胚乳及酵母浸出物(YE)等。这些天然复合物的成分比较复杂,大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。它对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用,但对器官的分化作用不明显。它的成分大多不清楚,一般添加了这些物质后,可能会影响到实验结果的重复性,在专门搞组织培养的研究时应慎重使用,但是在培养某些难以成功的植物时,还是值得一试的。

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