注射用头孢唑啉钠是临床上广泛应用的β-内酰胺类抗生素，因其分子结构上的特殊性，其原料和制剂成品中，含有少量致敏源——高分子聚合物，《中国药典》2005年版二部对其作出严格规定:按外标法以峰面积计算，原料中含头孢唑啉聚合物应不得超过0.03%；注射用粉针剂中应不得超过0.04%。为了更好地提高检验的可信度，本文对头孢唑啉钠粉针剂中聚合物含量的测量不确定度进行分析与评定。
一、测量方法
本品依据《中国药典》2005年版二部，照分子排阻色谱法测定。取本品内容物，混匀，精密称取适量，加水使溶解并定容为每1mL中约含20mg的供试品溶液，立即精密吸取20μL注入色谱仪，记录色谱图；另精密称取头孢唑啉对照品适量加水使溶解并定容为每1mL中约含10μg的对照品溶液，与样品同法测定。按外标法以峰面积计算即得。
二、数学模型
式中:Cx——头孢唑啉聚合物含量；A——供试品溶液中头孢唑啉聚合物的峰面积；CR——对照品溶液的浓度(WR/VR)；PR——对照品标示含量(纯度)，以质量分数表示，0.993；V——供试品溶液体积；AR——对照品溶液中头孢唑啉的峰面积；W——样品称量质量。测定结果如表1所示(n=4)。
<CTSM>表1头孢唑啉钠粉针剂聚合物含量测定结果</CTSM>
由于A、PR、CR、V、AR、W之间彼此独立，所以根据式(1)可知，测得值的相对标准不确定度为
u2rel(Cx)=u2rel(A)+u2rel(PR)+u2rel(CR)+u2rel(V)+u2rel(AR)+u2rel(W)(2)
三、不确定度分量的分析与定量
1.重复测定的不确定度(A类评定)
本品检验依据《中国药典》2005年版二部，假设方法准确度为100%，不考虑由峰面积线性、自动进样系统准确度等引入的不确定度，而仅考虑由容量瓶定容(V、VR)、称量质量(W、WR)、峰面积值读数(A、AR)等操作的重复性所引入的不确定度，并将各重复性分量合并为总实验的一个分量，利用重复测量数据将其量化(A类评定)。
测量次数较少，用极差法计算，因为n=4，故极差系数取2.06，则
由于重复性测定的标准不确定度u(rep)为0.0000294，4次独立测定所得样品中聚合物含量为0.000225、0.000295、0.000175、0.000174，平均含量
为0.000217，故重复测定的算术平均值的相对不确定度为
2.对照品溶液浓度CR引入的不确定度分量
(1)数学模型
式中:WR——对照品称量质量；VR——对照品溶液体积。WR、VR相互独立，其相对不确定度计算公式为
u2rel(CR)=u2rel(WR)+u2rel(VR)
(2)对照品称量质量WR(mg)引入的不确定度分量
实验室使用METTLER AE163电子天平，经鉴定为1级，实际分度值为0.01mg，最大允许误差为0.05mg，按照正态分布评定，其扩展不确定度U=0.01mg(k=3)，自由度ν1=∞，标准不确定度u=0.05/3=0.0167mg。实际操作中用减量法两次称量，其相对不确定度为
(3)对照品溶液体积VR(mL)引入的不确定度分量
①体积校准
实验中使用1000mL容量瓶(A级)，依据JJG196-2006《常用玻璃量器》检定规程，其最大允许误差MPE=±0.40mL。按照矩形分布评定，不确定度为
②温度效应
实验时的温度波动范围为3℃，水的体积膨胀系数为2.1×10-4mL/℃，依据矩形分布评定，不确定度为
故对照品溶液体积VR(mL)引入的不确定度为
相对不确定度为
故对于对照品溶液浓度CR而言，由对照品溶液体积VR引入的相对不确定度urel(CR)为
3.对照品纯度PR引入的不确定度分量
头孢唑啉聚合物对照品含量为0.993，PR:1.000±0.007，无预处理(如干燥)过程，即无其他不确定度来源。按矩形分布评定，取包含因子
，同理
4.供试品溶液体积V引入的标准不确定度
实验中，样品用25mL量瓶加水定容，浓度为20mg/mL。
(1)体积校准
实验时使用25mL容量瓶(A级)，依据JJG196-2006，其最大允许误差MPE=±0.03mL。按照矩形分布评定，不确定度为
(2)温度效应
实验时的温度波动范围为3℃。水的体积膨胀系数为2.1×10-4mL/℃，依据矩形分布评定，不确定度为
故供试品溶液体积V引入的不确定度为
相对不确定度为
5.供试品称量质量W引入的不确定度分量
天平校准:实验使用METTLER AE163电子天平，经鉴定为1级，实际分度值为0.1mg，最大允许误差为±0.5mg，按照正态分布评定，其标准扩展不确定度U=0.1mg(k=3)，自由度ν1=∞，标准不确定度u=0.5/3=0.167mg。实际操作中用减量法两次称量，4次称量平均值为512.6mg。所以，由供试品称量W引入的算术平均值的相对不确定度为
三、相对合成标准不确定度(见表2)
<CTSM>表2头孢唑啉粉针剂中聚合物含量测量不确定度</CTSM>
四、相对扩展不确定度
Urel=kucrel(Cx)=2×0.1356=0.2712(k=2)
五、不确定度评定与表示
头孢唑啉钠粉针剂中头孢唑啉聚合物含量Cx测定的不确定度评定与表示为0.000217±0.000059。
